چکیده:
در گذشته معمولاً از روش‌های شيميايي براي توليد قطعات نوکلئوتيدي استفاده می‌کردند، اما اين روش‌ها پرزحمت بود و نياز به مدت زمان طولاني داشت. از سال 1980 به بعد عمدتاً از روش PCR در آزمایشگاه‌های زیست‌شناسی مولکولي استفاده می‌شود.PCR تکنیکی است که با استفاده از آن می‌توان در مدت زمان کوتاهی قطعه خاصی از مولکول DNA را در شرایط آزمایشگاهی میلیون‌ها بار تکثیر نمود. اساس این روش بسیار ساده بوده و مانند واکنش همانندسازی DNA در موجودات زنده توسط آنزیم DNA پلیمراز صورت می‌گیرد. این قطعه DNA ممکن است یک ژن، بخشی از یک کروموزوم یا بخش‌هایی از ژنوم یک موجود باشد.
تعریف PCR :
در تعریف PCR ابتدا باید به توضیحی در رابطه با مولکول DNA و همانندسازی DNA پرداخت.
مولکول DNA ساختار مارپیچ دو رشته‌ای غیر موازی است که دو رشته به وسیله پیوندهای هیدروژنی به هم وصل شده‌اند. در مولکول DNA بین بازهای آدنین با تیمین دو پیوند هیدروژنی و بین سیتزین با گوانین سه پیوند هیدروژنی وجود دارد. هر کدام از بازها به یک قند دزوکسی ریبوز متصل است و هر مولکول قند از طریق گروه فسفات به مولکول قند مجاور متصل است.
بنابراین کوچک‌ترین واحد DNA که نوکلئوتید نام دارد از یک گروه فسفات، یک مولکول قند و یک باز آلی نیتروژن دار تشکیل‌شده است. کربن‌های 3 و 5 که مربوط به قندهای مجاور هستند از طریق یک گروه فسفات به هم متصل شده‌اند بنابراین هر رشته DNA یا RNA دارای یک انتهای’ 5 و یک انتهای ’3 است و انتهای ’5 یک‌رشته DNA مکمل در انتهای’ 3 رشته مقابل است. در RNA به جای باز آلی تیمین، یوراسیل وجود دارد.
درطی همانندسازی DNA از یک مولکول DNA اولیه دو مارپیچ مضاعف حاصل می‌شود و هر رشته اولیه به عنوان الگو برای ساخت یک‌رشته جدید مورداستفاده قرار می‌گیرد و در هر یک از مارپیچ‌های حاصل یک‌رشته اصلی و یک‌رشته جدید خواهد بود.
برچسب ها:
انواعpcr انواع واکنش زنجیره ای پلیمراز Real Time PCR